纯化水微生物限度检测可以用直接接种方法吗,怎么操作?纯化水微生物限度检测可以使用直接接种方法,可参考以下操作步骤:
样品准备:
确保所使用的容器、取样的吸管、镊子等用品均已灭菌。取水点应先打开让水流动一段时间,然后快速取适量水样到容器中,并将其带入微生物限度实验室。
样品稀释(非必需步骤,根据实际情况选择):如果纯化水的微生物含量可能较高,需要进行稀释以保证菌落计数在可观察的范围内。通常制备 10⁻¹、10⁻²、10⁻³ 等不同稀释梯度的样品9。例如,取 10ml 纯化水加入到 90ml 的无菌稀释剂(如 pH7.0 氯化钠-蛋白胨缓冲液)中,可得到 10⁻¹ 稀释度的样品,以此类推进行其他梯度的稀释。
接种:
细菌接种:对于细菌计数,取各稀释度的样品 1ml,分别接种到无菌的营养琼脂培养基平板上。每个稀释级别接种 2 个平板,以增加结果的准确性。使用涂布棒或其他工具将样品均匀涂布在培养基表面,注意操作过程要尽量避免污染。
霉菌和酵母菌接种:对于霉菌及酵母菌计数,取各稀释度的样品 1ml,接种到无菌的玫瑰红钠琼脂培养基平板上。同样每个稀释级别接种 2 个平板。
培养:
将接种后的细菌培养基平板倒置于 30-35℃的培养箱中培养 48-72 小时,逐日点计菌落数,一般以 72 小时的菌落数报告。
将接种后的霉菌和酵母菌培养基平板倒置于 23-28℃的培养箱中培养 5-7 天,逐日点计菌落数,以最终的菌落数报告。
结果观察与计数:在培养结束后,观察培养基平板上的菌落生长情况。选择菌落数在 30-300cfu(细菌)或 20-200cfu(霉菌和酵母菌)的平板进行计数,并根据稀释倍数计算出每毫升纯化水中的微生物数量5。
不过,直接接种法在纯化水微生物限度检测中的应用存在一定的局限性,因为纯化水的微生物含量通常较低,直接接种可能无法准确检测出其中的微生物,所以薄膜过滤法是更为常用和推荐的方法。